实验性脉络膜新生血管中Rap1、鸟苷三磷酸-Rap1、血管内皮生长因子及β-连环蛋白的表达研究

摘要

目的观察实验性脉络膜新生血管（CNV）中Rap1,鸟苷磷酸-Rap1 （GTP-Rap1）,血管内皮生长因子（VEGF）及β-连环蛋白（β-catenin）的表达,方法 42只棕色挪威大鼠随机分为空白对照组、模型组,分别为7、35只;均双眼入组。模型组大鼠氪离子激光光凝建立CNV模型。光凝后3、7、14、21、28 d行荧光素眼底血管造影（FFA）、脉络膜血管铺片检査,观察光凝后不同时间大鼠荧光素渗漏程度以及CNV面积的变化。蛋白免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测CNV中Rap1、GTP-Rap1、 VEGF、β-catenin蛋白和mRNA表达。结果FFA检查结果显示,光凝后14d,光凝斑出现大片圆盘状荧光素渗漏。激光共聚焦显微镜观察发现,与光凝后7 d时CNV面积比较,光凝后14、21、28 d时CNV面积增加,差异均有统计学意义（t=3.725、 5.532、3.605,P＜0.05）。Western blot检测结果显示,与空内对照组比较,光凝后不同时间点,CNV中Rap1蛋白相对表达量差异均无统计学意义（P=0.156）; GTPRap1蛋白相对表达量显著降低,VEGF、β-catenin蛋白相对表达量明显增高,差异均有统计学意义（P=0.000）。RT-PCR检测结果显示,与空白对照组比较,光凝后不同时间点,CNV中Rap1 mRNA相对表达量差异无统计学意义（P=0.645）;β-catenin mRNA相对表达量差异均有统计学意义（P=0.000）。7、14、21、28 d, GTP-Rap1、VEGF mRNA相对表达量差异均有统计学意义（P=0.000）。结论实验性CNV中GTPRap1表达较正常大鼠明显减少。