T细胞识别的黑色素瘤抗原1在人脉络膜黑色素瘤细胞系中的表达

摘要

目的 观察T细胞识别的黑色素瘤抗原1（MART-1）在人脉络膜黑色素瘤细胞系中的表达及启动子甲基化对其表达的可能影响。方法 人脉络膜黑色素瘤细胞系92-1、92-2、Me1285和Ocm3常规培养。采用免疫荧光染色流式细胞仪及Western blot检测各细胞系MART-1蛋白的表达；RT-PCR检测各细胞系中MART- 1 mRNA转录水平；甲基敏感的限制性核酸内切酶消化结合Southern blot分析MART-1启动子DNA的甲基化状态。结果 免疫荧光染色流式细胞仪及Western blot检测结果显示,MART-1蛋白在92-1、92-2和Ocm3细胞系表达阳性,Me1285细胞系表达阴性。与蛋白检测结果一致,RT-PCR检测可见MART-1 mRNA在92-1、92-2、Ocm3细胞系中转录,Me1285未观察到转录。MART-1阳性细胞系92-1、92-2、Ocm3和阴性细胞系Mel285存在不同的甲基化模式。阳性细胞系在MspⅠ/HpaⅡ位点甲基化,内含子NruⅠ位点未甲基化；而阴性细胞系在MspⅠ/HpaⅡ位点未甲基化,NruⅠ位点过甲基化。结论 MART-1可在人脉络膜黑色素瘤细胞系92-1、92-2和Ocm3中表达。MART-1启动子甲基化模式的改变可能影响MART-1的转录。