表皮生长因子诱导人视网膜色素上皮细胞整合素α5表达对细胞增生和迁移的影响

摘要

目的观察表皮生长因子（EGF）诱导人视网膜色素上皮（RPE）细胞整合素α5表达对细胞增生和迁移的影响。方法在0.1、1.0、10.0、20.0、100.0ng/mlEGF浓度条件下,体外培养人RPE细胞。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及流式细胞术观察不同浓度组整合素α5mRNA和蛋白的表达。后将实验分为Dulbecco改良的Eagle培养基（DMEM）/F12、DMEM/F12+10.0ng/mlEGF、DMEM/F12+10.0ng/mlEGF+兔抗人整合素α5多克隆抗体（1∶100）及DMEM/F12+10.0ng/mlEGF+兔抗人波形蛋白抗体（1∶100）组,采用噻唑蓝（MTT）比色法和Boyden小室法检测细胞增生及迁移。结果 RT-PCR检测显示,细胞培养12h,EGF对人RPE细胞整合素α5mRNA合成无明显影响（F=0.618,P=0.687）;细胞培养24、48h,EGF能刺激人RPE细胞合成整合素α5mRNA,并呈浓度依赖性（F=465.303,212.340;P=0.000,0.000）。流式细胞术检测显示,10.0ng/ml组整合素α5荧光强度最强,与空白对照组和0.1ng/ml组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）。MTT比色法和Boyden小室法检测显示,整合素α5的表达促进人RPE细胞增生和迁移。结论 EGF促进整合素α5mRNA和蛋白的表达,整合素α5的表达促进人RPE细胞增生和迁移。