高糖对体外培养的视网膜Müller细胞表达蛋白转录活化因子4的影响

摘要

目的观察高糖对体外培养的视网膜Müller细胞表达蛋白转录活化因子4（ATF4）的影响。方法组织块悬浮法体外原代培养Sprague-Dawley（SD）大鼠视网膜Müller细胞,用链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物（SABC）法对Müller细胞进行神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）及谷氨酰胺合成酶（GS）的鉴定。将培养的视网膜Müller细胞分为正常对照组和A、B、C组,正常对照组使用5.5mmol/L葡萄糖培养液,A、B、C组分别使用20.0、30.0、40.0mmol/L葡萄糖培养液进行。培养4d后,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测各组视网膜Müller细胞上ATF4蛋白的表达。结果体外培养的细胞均为视网膜Müller细胞,95%以上细胞染色呈GFAP及GS阳性。A、B、C组视网膜95%的Müller细胞呈阳性。Western blot检测显示,4d后A、B、C组Müller细胞表达ATF4蛋白的量均较正常对照组升高,组间比较,差异有统计学意义（q=0.293、0.754、0.484,P＜0.05）。结论高糖能促使体外培养下的视网膜Müller细胞表达内质网应激蛋白ATF4增加,高糖培养下的视网膜Müller细胞可发生内质网应激反应。