光照对人视网膜色素上皮细胞趋化因子受体3配体的影响

摘要

目的观察光照后人视网膜色素上皮（RPE）细胞趋化因子受体3（CCR3）配体嗜酸性粒细胞趋化因子（eotaxin）-1、eotaxin-2、eotaxin-3的表达。方法体外培养人RPE细胞,取第5～10代生长状态良好的传代细胞用于实验。将同代细胞随机分为光照干预组与正常对照组。采用15 W蓝色荧光灯自制光照器,以（600±100）Lux的强度对光照干预组细胞持续光照12h,对照组细胞采用双层高压消毒锡纸包裹。随后两组细胞均置于恒温培养箱内继续培养,并于光照结束后0、3、6、12、24h终止细胞培养。采用实时聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法分别检测eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA和蛋白的表达。结果光照干预组细胞eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA和蛋白表达均随培养时间延长呈上升趋势,其中eotaxin-3mRNA和蛋白表达增加最为明显。光照干预组与正常对照组比较,光照结束后0（t1=6.05,t2=12.561）、3（t1=2.95,t2=3.67）h时eotaxin-1、eotaxin-2mRNA表达间差异均有统计学意义（P＜0.05）,eotaxin-3mRNA表达间差异无统计学意义（t3=1.57、1.00,P＞0.05）;光照结束后6（t1=4.73,t2=18.64,t3=28.48）、12（t1=3.11,t2=20.62,t3=18.50）、24（t1=8.25,t2=38.27,t3=18.60）h时eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA表达间差异均有统计学意义（P＜0.05）。光照干预组与正常对照组比较,除光照结束后3h时eotaxin-3蛋白表达间差异无统计学意义外（t3=1.28,P＞0.05）;光照结束后0（t1=4.85,t2=5.45,t3=6.21）、3h（t1=5.64,t2=4.55）、6（t1=31.60,t2=6.63,t3=7.15）、12（t1=14.09,t2=18.22,t3=15.76）、24（t1=6.96,t2=10.47,t3=12.85）h时eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3蛋白表达间差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论光照后人RPE细胞CCR3配体eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA和蛋白表达均随培养时间延长呈上升趋势,以eotaxin-3表达增加最为突出。