腺病毒介导的重组Tum5基因抑制视网膜新生血管的实验研究

摘要

目的观察腺病毒介导的重组Tum5基因（rAd-Tum5）对氧诱导视网膜病变（OIR）模型小鼠视网膜新生血管的抑制作用。方法 7日龄C57BL/6J小鼠96只,随机分为正常组、OIR组、rAd-绿色荧光蛋白（GFP）空载体组（OIR rAd-GFP组）和重组Tum5基因组（OIR rAd-Tum5组）,每组均为24只。参照文献方法建立OIR模型。12日龄时,OIR rAd-GFP组、OIR rAd-Tum5组小鼠双眼玻璃体腔分别注射病毒滴度为1×1011 pfu/ml的rAd-GFP、rAd-Tum5病毒1μl。OIR组、正常组小鼠双眼玻璃体腔分别注射等体积无菌生理盐水。视网膜铺片观察视网膜无灌注区相对面积,病理切片计数突破内界膜的视网膜前细胞核数,免疫荧光法及蛋白免疫印迹法检测小鼠视网膜中血管内皮生长因子（VEGF）表达情况。结果正常组、OIR组、OIR rAd-GFP组、OIR rAd-Tum5组小鼠视网膜无灌注区相对面积比较,差异有统计学意义（F=61.224,P＜0.01）。组间视网膜无灌注区相对面积比较,OIR rAd-GFP组与OIR组差异无统计学意义（P=0.827）;OIR rAd-Tum5组与OIR组、OIR rAd-GFP组差异均有统计学意义（P＜0.01）。4组间突破内界膜的视网膜前细胞核数比较,差异有统计学意义（F=635.738,P＜0.01）。组间突破内界膜的视网膜前细胞核数比较,OIR rAd-GFP组与OIR组差异无统计学意义（P=0.261）;OIR rAd-Tum5组与OIR组、OIR rAd-GFP组差异有统计学意义（P＜0.01）。与正常组小鼠视网膜VEGF表达比较,OIR组和OIR rAd-GFP组VEGF表达均上调,OIR rAd-Tum5组小鼠视网膜VEGF表达较OIR组和OIR rAd-GFP组呈下降趋势。结论重组rAd-Tum5基因可以抑制视网膜新生血管生成,可能与下调VEGF表达有关。