抑制光损伤人视网膜色素上皮细胞血管内皮生长因子A的表达对趋化因子受体3配体表达的影响

摘要

目的观察抑制光损伤人视网膜色素上皮（RPE）细胞血管内皮生长因子A（VEGF-A）的表达对趋化因子受体3（CCR3）配体嗜酸细胞活化趋化因子（eotaxin）表达的影响。方法体外培养人RPE细胞,取第8~12代生长良好的传代细胞用于实验。将同代细胞随机分为正常对照组、光照损伤组和光照干预组。采用波长400nm的蓝色节能灯以（600±100）Lux持续光照RPE细胞12h建立光损伤模型,光照干预组采用0.125mg/ml的VEGF-A受体拮抗剂雷珠单抗处理光损伤的RPE细胞;正常对照组以锡箔纸包裹细胞培养皿避光培养。结束光照24h时,应用实时聚合酶链反应、酶联免疫吸附测定、蛋白免疫印迹法及免疫组织化学染色法检测3组细胞中VEGF-A、eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3及核因子（NF）-κB的mRNA和蛋白表达情况。结果光照损伤组VEGF-A、eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3、NF-κB的mRNA和蛋白表达较正常对照组明显增加,差异均有统计学意义（P＜0.05）。光照干预组VEGF-A、eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3、NF-κB的mRNA和蛋白表达较光照损伤组明显降低,差异也有统计学意义（P＜0.05）。结论抑制光损伤后人RPE细胞VEGF-A的表达可以下调CCR3配体eotaxin的表达,其机制可能与阻断转录因子NF-κB的激活有关。