轴突导向因子netrin-1在滋养层细胞侵袭中的作用

摘要

目的探讨轴突导向因子netrin-1在滋养层细胞侵袭中的作用及其机制。方法采用RT-PCR技术检测绒毛膜外滋养细胞株TEV-1中netrin-1的6种受体（UNC5A、UNC5B、UNC5C、UNC5D、DCC和neogenin）mRNA的表达。将培养的细胞按照加入netrin-1蛋白浓度的不同分为10μg/L组、50μg/L组、100μg/L组、500μg/L组、1000μg/L组、5000μg/L组和阴性对照组（netrin-1的浓度为0μg/L）共7组,分别用细胞计数试剂盒8检测各组细胞的增殖能力[以吸光度（A）值表示],体外侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力。结果 （1）RT-PCR技术检测结果显示,netrin-1的6种受体中,仅检测到neogenin和UNCSB mRNA的表达。（2）培养72 h后,10μg/L组、50μg/L组、100μg/L组、500μg/L组、1000μg/L组和5000μg/L组细胞的A值分别为1.55±0.29、1.72±0.31、2.15±0.35、1.42±0.25、1.50±0.27和1.38±0.23,分别与阴性对照组（1.00±0.16）比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。（3）培养6 h后,10μg/L组、50μg/L组、100μg/L组、500μg/L组、1000μg/L组和5000μg/L组细胞的穿膜细胞数分别为（41±4）、（47±5）、（55±6）、（44±5）、（43±5）和（42±5）个,分别与阴性对照组[（30±4）个]比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。（4）neogenin mRNA的表达水平,10μg/L组、50μg/L组、100μg/L组、500μg/L组、1000μg/L组和5000μg/L组分别为1.50±0.16、1.83±0.19、2.24±0.25、2.12±0.24、2.12±0.23和2.13±0.23,分别与阴性对照组（1.00±0.11）比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;10μg/L组与50μg/L组比较,50μg/L组与100μg/L组比较,差异也均有统计学意义（P＜0.05）;100μg/L组与500μg/L组、1000μg/L组和5000μg/L组之间两两比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。（5）UNC5B mRNA的表达水平,10μg/L组、50μg/L组、100μg/L组、500μg/L组、1000μg/L组和5000μg/L组分别为1.09±0.11、1.47±0.14、1.61±0.16、1.85±0.19、2.21±0.21和2.42±0.23,分别与阴性对照组（1.00±0.07）比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;各组之间分别比较,差异也均有统计学意义（P＜0.05）。结论 netrin-1能促进人绒毛膜外滋养细胞的增殖和侵袭能力,这种促进作用受到其受体neogenin及UNC5B的调控。