低氧条件下BAVM动物模型VSMC中TGF-β表达及细胞功能改变

摘要

目的 探讨分析缺氧对脑动静脉畸形(BAVM)血管内膜平滑肌细胞(VSMC)中转化生长因子-β (TGF-β)表达及VSMC细胞功能改变.方法 建立稳定的BAVM实验用猪动物模型,分离脑底微血管网(RM)的VSMC后行原代培养.分组:①对照组采用正常实验用猪VSMC:(A组)21％ O2浓度;②实验组采用BAVM模型实验用猪VSMC:(B组)21％ O2浓度、(C组)1％ O2浓度.细胞免疫荧光检测VSMC密度、实时定量-多聚酶链反应(RT-PCR)和蛋白印记(Westem blot)法验证VSMC中TGF-β mRNA及蛋白差异、末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记(TUNEL)法检测VSMC的调亡、Transwell测定VSMC的侵袭能力.结果 VSMC对缺氧敏感,实验组与对照组比较及实验组组间比较,TGF-β的mRNA及蛋白差异有统计学意义(P＜0.01)、72 h VSMC凋亡及细胞侵袭数目差异有统计学意义(P＜0.01).结论 缺氧对动物模型VSMC中TGF-β表达有显著的影响且促使VSMC凋亡及侵袭能力增加,加速畸形血管团的形成.在细胞分子生物学水平分析能为BAVM临床治疗提供一种有益的思路.