cGAS识别HTLV-1反转中间体并诱导STING依赖性的固有免疫应答

摘要

目的 探讨DNA识别受体环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cGAS）在成人T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）感染过程中对病毒反转中间体的识别以及诱导的下游信号通路。方法 将生物素标记的HTLV-1的反转中间体ssDNA90转染入HeLa细胞,采用免疫共沉淀试验检测cGAS与ssDNA90的相互作用；将HeLa细胞与HTLV-1阳性细胞系MT2共培养,采用免疫共沉淀的方法检测cGAS与干扰素基因刺激蛋白（STING）的相互作用；采用siRNA的方法在HeLa细胞中敲减STING,24 h后再转染入cGAS表达质粒,24 h后与MT2细胞共培养24 h,real-time PCR实验检测HeLa细胞中干扰素（IFN）-β、调节活化正常T细胞表达和趋化因子（RANTES）、肿瘤坏死因子（TNF）-α、HTLV-1病毒蛋白Tax、p19以及HBZ的表达,免疫印迹检测HeLa细胞中干扰素调节因子3（IRF3）和p65的磷酸化水平。结果 cGAS与ssDNA90存在相互作用；cGAS与STING存在相互作用,且作用部位在胞质中；在敲减STING的HeLa细胞中,cGAS过表达对IFN-β、RANTES和TNF-α的表达量无明显影响,对HTLV-1病毒蛋白Tax、p19和HBZ的表达量无明显影响,对IRF3和p65的磷酸化水平无明显影响。结论 cGAS可结合HTLV-1的反转中间体ssDNA90并通过STING激活固有免疫应答。