牙槽突裂组织工程骨修复的脂肪间充质干细胞体外三维培养促成骨的研究

摘要

目的探讨脂肪间充质干细胞在Matrigel凝胶中三维培养条件下成骨效果, 为牙槽突裂组织工程骨修复提供理论依据。方法 2019年6月于广州市妇女儿童医疗中心实验室, 取第4代脂肪间充质干细胞（adipose derived stem cells, ADSC）, 调整细胞密度为1×105/ml, 分别用二维普通培养液（A组）、二维成骨诱导培养液（B组）、凝胶包裹ADSC联合成骨诱导培养液（C组）对ADSC进行培养, 用CCK8法检测细胞增殖情况;用茜素红染色、碱性磷酸酶活性检测细胞矿化效果, 用Western印迹法和qRT-PCR检测骨钙素和骨桥蛋白的表达量。结果 ADSC包裹于水凝胶中, CCK8试剂盒检测显示ADSC在三维和二维培养条件下一样, 增殖稳定。ADSC在三维培养条件下茜素红染色及碱性磷酸酶活性明显高于二维培养环境。在Western印迹法和RT-PCR检测中发现三维培养时ADSC的成骨蛋白及mRNA的表达也高于二维培养。结论 ADSC包裹于水凝胶不影响干细胞的增殖能力, 而3D培养干细胞可明显增强其体外的成骨能力, 可作为种子细胞用于组织工程骨修复牙槽突裂。