单核巨噬细胞集落刺激因子诱导创伤后成纤维细胞生成血管内皮生长因子的研究

摘要

目的探讨创伤愈合过程中单核巨噬细胞集落刺激因子（GMCSF）调控新生血管化的分子机制。方法将成纤维细胞分为空白对照组、GMCSF组、GMCSF+Go6976组以及Go6976组,空白组应用GMCSF溶解液PBS处理;GMCSF组应用50 ng/L的GMCSF处理;GMCSF+Go6976组先加入50 ng/L的GMCSF和10μmol/L的Go6976处理;Go6976组用10μmol/L的Go6976处理。应用GMCSF作用成纤维细胞后,采用Western印迹法观察蛋白激酶磷酸化水平;采用酶联免疫吸附试验检测血管内皮生长因子（VEGF）表达,采用凝胶电泳迁移试验检测核因子-κB的活化。结果 GMCSF作用成纤维细胞45 min蛋白激酶C蛋白相对表达量0.434±0.056,与0 min 0.224±0.035比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;ELISA显示,GMCSF+Go6976处理组VEGF表达量为39.26±7.63,与GMCSF组的86.75±10.78比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;凝胶电泳迁移实验结果显示,GMCSF组核因子-κB为82835±4565,GMCSF+Go6976组为71279±3658,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 GMCSF可通过PKC活化核因子-κB,从而诱导人皮肤成纤维细胞VEGF的表达。