食管鳞癌患者血浆与肿瘤组织DNA甲基化检测的应用价值

摘要

目的研究食管鳞癌患者肿瘤组织和血L浆多接因甲基化状态及其对食管鳞癌诊断的应用价值方法用甲基化特异性聚合酶链反应（methylation spesific.polymerase chain reaclion,MSP）检测76例食管鳞癌患者肿瘤组织、配对癌旁正常组织、患者术前l d、术后7 d血浆游离DNA中腺瘤性息肉增基因（adenonla|ous polyposis coli.APC）、维甲酸受体β2基因（relinoic acid receptor-beta2,RARβ2）、上皮细胞钙黏蛋白基因（E-cadherin.CDH1）、细胞周期蛋白依赖激酶抑制刺4A家族p16基因（cyclin-dependent kinase inhibitor4A,p16INK4α）、Ras相关家族蛋白1A基因（ras association domainfamily lnelnbPr 1A.RASSF1A）甲某化.选取同期60名年龄、性别匹配的健康志愿者血浆DNA作对照。用X~2检验分析各类组织与血浆标本中5个基因DNA甲基化率的差异;血浆与食管鳞癌组织标本DNA甲基化的相关性用Speannan相关分析;绘制受试者操作特征（receiveoperating characteristic,ROlC）曲线评价单基因与5个基因联合检测诊断食管鳞癌的敏感度、特异度。结果食管鳞癌组肿瘤组织中的APC、RARβ2:、CDH1、p161NK4α、RAKSF1A基因甲基化阳性率分别为44.7%（34/16）、72.4%（55/76）、72.4%（55/76）、86.8%（66/76）、55.3%（42/76）,均显著高于对应癌旁正常组织[6.6%（5/76）、3.9%（3/76）、3.9%（3/76）、3.9%（3/76）、2.6%（2/76）,/值分别为29.O1、75.39、75.39、105.34、57.18.P均＜0.001].,食管鳞癌组术前血浆中5个准因的甲基化阳性率分别为42.1%（32/76）、63.2%（48/76）、63.2%（48/76）、71.1%（54/76）、50.O%（38/76）,均显著高于健康对照组:3.3ek（2/60）.3.3%（2/60）.1.7%（1/60）、3.3%（2160）、1.7%（1/60）☆值分男为26.88、51.62、55.0l,63.48、38.30.P均＜0.OO1]。食管鳞癌患者血L浆与肿瘤组织中5个基因甲基化的符合率均较高（Kaplm值分圳为0.679、0.791、0.791、0.542、0.895,P均＜O.001）。血浆中APC、RARβ2、CDH1、p161NK4α、RASSF1A基因甲基化单项诊断食管鳞癌的敏感度分别为42.1%（32/76）、63.2%（48/76）、63.2k（48/76）、71.1%（54/76）、50.0%（38/76）.特异度分别为96.7%（58/60）、96.7%（58/60）,98.3k（59/60）、96.7%（58/60）、98.3%（59/60）;ROC曲线下面积（AUC）分别为0.694:95%可信限（CI）0.606～0.782]、0.799（95%CI0.723～0.875）、0.807（95%CI0.733‖0.882）、0.839【95%CI0.769～0.908).0.742（95%C/0.659‖0.824）;5个基因联合检测血浆甲基化的敏感度为80.3%（61/76）,特异度88.3%（53/60）,ROC曲线AUC为0.843（95%C,0.773～0.913）。联合检测的敏感度显著高于APC、RASSF1A单项检测（X~2值分别为23.30、15.33,P均＜0.001）,但与RARβ2,CDH1、p161NK4α的敏感度差异无统计学意义（X~2值分别为5.48、5.48、1.75,P值分别为0.019、0.019、0.186）;联合检测与单项检测的特异度差异无统计学意义（X~2值分圳为1.922、1.922、3.348、1.922、3.348.P均＞0.05）结论食管鳞癌患者血浆与肿瘤组织中抑癌基因甲基化符合率{均较高.血浆中5个基因甲某化联合检测诊断食管鳞癌与单基因检测相比无显著优势.但前者敏感度高于异者.