低强度超声联合载HSV1-TK/GCV自杀基因阳离子微泡对高强度聚焦超声不完全消融后残余肝癌细胞的抑制作用

摘要

目的 探讨载单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶/更昔洛韦(HSV1TK/GCV)自杀基因的阳离子微泡联合低强度超声对高强度聚焦超声(HIFU)辐照后残留肝癌SMCC 7721细胞的抑制作用.方法 以低功率HIFU辐照肝癌SMCC-7721细胞,选取最佳残存细胞亚系并稳定培养.通过低强度超声辐照载TK基因的阳离子微泡转染细胞.分为对照组(残余癌)、残余癌+超声+ TK/GCV组、残余癌+微泡+TK/GCV组及残余癌+微泡+超声+TK/GCV组.以WesternBlot法检测TK基因是否成功转入并稳定表达.采用流式细胞仪观察并检测基因转染效率.筛选适宜前药GCV浓度,并检测各组别相同条件下细胞存活率.以流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率.结果 HIFU功率为5W,频率为10.20 MHz,持续辐照40 s,可获得残癌稳定模型.前药GCV的最适浓度为100 μg/ml.相同条件下残余癌+微泡+超声+TK/GCV组癌细胞存活率最低(P＜0.05),仅为(43.16±3.18)％,且TK蛋白的表达明显高于其他各组(P均＜0.05).结论 低强度超声联合载HSV1-TK/GCV自杀基因阳离子微泡对高强度聚焦超声不完全消融肝癌细胞有明显抑制作用.