T淋巴细胞活化诱导的细胞死亡在肾综合征出血热发病中的作用

摘要

目的研究肾综合征出血热（HFRS）患者外周血T淋巴细胞（PBL-T）活化诱导细胞死亡（activation-inducedcelldeath,AICD）的发生情况,探讨AICD在HFRS发病机制中的作用。方法以免疫磁珠负性分离PBL-T;应用植物血凝素（PHA）和离子霉素（ionomycin）体外培养诱导细胞活化;采用HE染色和脱氧核苷酸原位末端标记法（TUNEL）染色观察凋亡情况并用流式细胞仪检测PBL-T的凋亡率。应用Westernblot检测HFRS患者外周血T淋巴细胞caspase-3的表达情况,用RT-PCR对汉坦病毒的特异性基因片段进行检测。结果HFRS患者诱导组PBL-T凋亡率为（27.79±0.99）%,明显高于未诱导组的（17.16±1.14）%（P＜0.01）;无论是否诱导,患者PBL-T的凋亡率均高于健康人。HFRS患者诱导组PBL-Tcaspase-3的17000活性成分表达显著增加。扩增产物测序结果,有19例患者血清出现阳性条带,其中汉滩病毒7例,汉城病毒12例。结论以PHA和离子霉素可有效地诱导体外培养的PBL-T发生AICD。HFRS患者PBL-T经激活诱导后凋亡率明显提高。有79.2%的患者可以扩增到汉坦病毒特异性的基因片段。HFRS患者PBL-T凋亡相关蛋白caspase-3的表达增加,提示AICD可能与HFRS的发病机制有关。