骨髓间充质干细胞对SD大鼠糖尿病溃疡创面成纤维细胞的影响

摘要

目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)在治疗SD大鼠糖尿病溃疡创面愈合中成纤维细胞的变化,揭示BMSCs促进创面愈合的机制。方法提取同种异体SD大鼠BMSCs,传至第3、4代备用。将SD大鼠分为3组,空白对照组(A组)、糖尿病对照组(B组)、BMSCs治疗组(C组),每组20只。A组普通饲料喂养,B组、C组采用高脂高糖饮食+小剂量链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型,成模后,在SD大鼠背部取直径为2cm创面,3d后,溃疡模型成模。B组取密度为1×109/L的BMSCs1mL的DMEM-F12培养基悬浊液注射于创面,A组、C组取1mL0.9%氯化钠溶液注射于创面,分别于即刻、3d、7d、14d、21d取创面组织制备切片,苏木精-伊红(HE)染色,观察成纤维细胞生长情况,并提取组织中成纤维细胞,观察其增殖活力以及创面愈合情况。结果高糖高脂饮食+小剂量链脲佐菌素注射1周后测血糖,A组大鼠血糖为(3.91±0.44)mmol/L,B组血糖为(21.29±0.45)mmol/L,C组血糖为(21.46±0.51)mmol/L,B组、C组血糖明显高于A组(P<0.05)。BMSCs治疗7d,计算创面愈合率,A组(26.91±2.12)%,B组(7.55±2.11)%,C组(20.64±2.54)%,与A组和C组相比,B组愈合率明显降低(P<0.01)。组织病理可见,与B组相比,C组创面组织中成纤维细胞数量明显增多,细胞核饱满,成纤维细胞增殖活力较强;C组创面组织成纤维细胞增殖率较A组低,但高于B组。结论在糖尿病溃疡创面愈合过程中,局部注射同种异体BMSCs可促进糖尿病溃疡创面局部成纤维细胞生长,从而促进创面愈合。