迷迭香酸抑制结肠癌细胞生长和间质转换并抑制AKT和ERK1/2的磷酸化

摘要

目的:探索迷迭香酸(RA)对结肠癌SW480细胞生长和间质转换的作用及其对丝/苏氨酸激酶(AKT)和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)磷酸化的影响.方法:采用CCK-8法检测不同浓度RA对SW480细胞的作用,设置RA浓度0、10、20、40μmol/L分别与细胞进行孵育.采用克隆形成实验检测细胞的生长,RT-PCR检测增殖相关蛋白Ki67和增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA水平,显微镜下观察细胞形态的上皮间质转化(EMT),免疫荧光检测波形蛋白(Vimentin)蛋白表达;Western blot检测上皮细胞钙黏素(E-cadherin)和神经钙黏素(N-cadherin)蛋白表达、AKT和ERK1/2的磷酸化水平.结果:随着RA剂量增加,RA浓度为20μmol/L和40μmol/L时,细胞的存活率和克隆形成率明显下降(P<0.05),Ki67和PCNA mRNA水平明显下降(P<0.05),E-cadherin蛋白表达明显增加(P<0.05),N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显下降(P<0.05),AKT和ERK1/2的磷酸化水平明显降低(P<0.05),显微镜下观察细胞分散,表现出间质细胞形态.结论:RA可以抑制SW480细胞增殖和间质转化,其作用可能与抑制AKT和ERK1/2的磷酸化有关.