microRNA-29a通过PI3K/AKT/mTOR信号途径抑制子宫内膜癌的发生

摘要

目的:探讨microRNA-29a(miR-29a)在子宫内膜癌细胞中的表达及意义.方法:应用基因芯片技术检测并分析在子宫内膜癌组织及正常子宫内膜组织中差异性表达的miRNA;RT-PCR检测子宫内膜癌组织及正常子宫内膜组织中miR-29a的表达水平;采用脂质体瞬时转染法将miR-29a mimic/inhibitor及相应的阴性随机对照序列转染入子宫内膜癌细胞系HEC-1A中;RT-PCR检测转染后细胞中的miR-29a表达水平;利用MTT、Transwell、划痕实验及Annexin V-FITC分别检测miR-29a对HEC-1A细胞增殖、侵袭、迁移及细胞凋亡的影响;miRNA靶基因预测网站Targetscan对miR-29a的靶基因进行预测,双荧光素酶基因报告及Western blot实验进行验证;最后应用Western blot检测miR-29a对子宫内膜癌细胞中PI3K/AKT/mTOR信号通路PI3K、p-AKT、mTOR蛋白表达的影响.结果:miR-29a在子宫内膜癌组织中的表达水平较正常子宫内膜组织明显降低(P=0.021);过表达miR-29a能够显著抑制HEC-1A的增殖(P=0.011)、侵袭(P=0.004)及迁移能力(P=0.004),促进其发生凋亡(P=0.007),而抑制HEC-1A细胞中miR-29a的表达能显著促进细胞的增殖(P=0.038)、侵袭(P=0.008)及迁移能力(P=0.027),抑制其发生凋亡(P=0.029);且过表达miR-29a能够在HEC-1A细胞中通过负向调控PI3K表达(P=0.023)下调p-AKT(P=0.037)、mTOR(P=0.019)蛋白表达,而抑制HEC-1A细胞中miR-29a的表达能够通过促进PI3K表达(P=0.044)上调p-AKT(P=0.039)、mTOR(P=0.028)蛋白表达.结论:子宫内膜癌中低表达miR-29a可能通过抑制PI3K的表达,从而下调PI3K/AKT/mTOR信号通路,抑制子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力,并促进细胞发生凋亡,从而发挥着抑癌基因的作用.