姜黄素通过激活AMPK信号通路介导的自噬抑制大鼠蛛网膜下腔出血后神经元凋亡

摘要

目的:探讨姜黄素(Cur)对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后神经元凋亡的影响及其作用机制.方法:将60只雄性SD大鼠随机分成5组:假手术组(Sham)、模型组(SAH)、Cur低剂量干预组(50 mg/kg,Cur-L)、Cur高剂量干预组(200 mg/kg,Cur-H)和高剂量Cur联合AMPK抑制剂Dorsomorphin干预组(200 mg/kg Cur+25 mg/kg Dorsomorphin,Cur-H+Dor),每组12只.除Sham组外,其余各组均采用血管内穿刺法建立大鼠SAH模型,术后立即给药,1次/d,连续3 d.评估各组大鼠神经功能情况并检测脑组织水肿程度;TUNEL染色法检测大鼠海马组织神经元凋亡情况;免疫荧光染色观察大鼠海马区LC3-Ⅱ蛋白颗粒形成情况;Western blot检测大鼠海马组织Beclin-1、LC3-Ⅱ、cleaved-caspase-3、AMPK、p-AMPK、mTOR和p-mTOR等蛋白表达水平.结果:与Sham组比较,SAH组大鼠脑组织含水量和海马组织神经元凋亡率均显著增加,神经功能评分和LC3-Ⅱ蛋白颗粒形成显著降低(P<0.05),且海马组织中cleaved-caspase-3和p-mTOR蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-AMPK等蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与SAH组相比,Cur-H组大鼠脑组织含水量以及海马神经细胞凋亡率均显著降低(P<0.05),神经功能评分和LC3-II蛋白颗粒形成显著增加(P<0.05),同时海马组织中LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-AMPK等蛋白表达水平均显著增加(P<0.05),而cleaved-caspase-3和p-mTOR蛋白表达水平显著降低(P<0.05),采用Dor联合干预可显著抑制高剂量Cur作用效果.结论:Cur能够改善大鼠SAH后神经损伤,其机制可能是通过激活AMPK信号通路介导的自噬进而抑制海马神经元凋亡.