丙泊酚通过上调miR-204对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭迁移和上皮间充质转化的影响

摘要

目的:探索丙泊酚(Propofol)对乳腺癌细胞MDA-MB-231中miR-204表达的影响及其对细胞侵袭迁移和上皮间充质转化的作用机制.方法:细胞分为对照(Control)组,Propofol组,miR-204 inhibitor阴性对照组和Propofol+miR-204 inhibitor组,miR-204 inhibitor转染细胞后通过丙泊酚处理细胞.RT-PCR检测miR-204及基质金属蛋白酶9(MMP-9)基因转录,Transwell法检测细胞侵袭,划痕愈合法检测细胞迁移,Western blot检测MMP-9、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达,荧光素酶报告基因实验检测miR-204和MMP-9的靶向作用关系.结果:Propofol(2、5、10μg/ml)组miR-204表达呈丙泊酚浓度依赖性升高.与Control组相比,Propofol组中miR-204表达升高,细胞侵袭和迁移能力下降,上皮间充质转化标志蛋白N-cadherin和Vimentin表达降低,E-cadherin表达升高,MMP-9基因转录和蛋白表达降低;miR-204 inhibitor组各指标变化与Propofol组相反;Propofol+miR-204 inhibitor组及miR-204 inhibitor显著减轻丙泊酚引起的各指标变化.结论:丙泊酚可上调miR-204表达,而miR-204通过靶向作用于MMP-9,抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的侵袭迁移和上皮间充质转化.