紫甘蓝提取物提高人非小细胞肺癌细胞系放射敏感性的研究

摘要

目的:探讨紫甘蓝提取物(PCE)对人非小细胞肺癌A549细胞放射敏感性的影响及机制.方法:用CCK-8试验检测不同浓度PCE对细胞活力的影响,确定最佳剂量浓度.将对数生长期的A549细胞在6孔板中(每孔1×105个/ml)接种并分为6组:对照组(CON,A组),10μmol/L PCE组(PCE-10μmol/L,B组)、50μmol/L PCE组(PCE-50μmol/L,C组)、照射组(IR,D组)、照射加10μmol/L PCE组(IR+PCE-10μmol/L,E组)、照射加50μmol/L PCE组(IR+PCE-50μmo/L,F组).照射后,检测PCE对A549细胞增殖的影响.流式细胞术检测PCE对照射后A549细胞凋亡的影响.Western blot检测照射后PCE对A549细胞凋亡途径中关键蛋白表达的影响.用qRT-PCR检测不同浓度PCE照射前后miRNA326的表达.结果:CCK-8结果显示,PCE能明显抑制A549细胞的增殖,且随着药物浓度的增加,其增殖抑制率增加.流式细胞术结果显示,D组细胞凋亡率为7.63％±0.27％,E组为9.62％±0.42％,F组为17.50％±0.37％,相对于D组,PCE显著提高了E组和F组照射后A549细胞的凋亡率(P<0.01).qRT-PCR结果显示,E组、F组miRNA326的表达显著上调(P<0.01),PCE能显著上调照射后A549细胞miRNA326的表达,且药物浓度越高,上调越明显.Western blot结果显示,PCE能显著降低Bcl-2的表达,增强Caspase-3和Caspase-9的活化,提高细胞凋亡水平.结论:PCE可通过上调miRNA326的表达和促进细胞凋亡来增强人非小细胞肺癌A549细胞的放射敏感性,且随着药物剂量的增加,其放射敏感性效应增强.