质粒DNA及其协同IFN-γ、CH50在巨噬细胞免疫功能激活中的作用

摘要

目的:研究真核表达质粒DNA在巨噬细胞免疫功能激活中的作用及其机制.方法:体外培养巨噬细胞,检测巨噬细胞一氧化氮(NO)分泌水平、FACS检测巨噬细胞表面分子的表达、MTT法测定巨噬细胞的细胞毒作用,以这些指标测定质粒DNA、质粒DNA/IFN-γ、质粒DNA/CH50多肽对体外巨噬细胞的直接激活作用.或腹腔注射质粒DNA,取腹腔巨噬细胞进行功能检测.结果:pCH510质粒和pcDNA3.1质粒在体内、外均可刺激巨噬细胞产生NO.激活的巨噬细胞表面分子MHC-Ⅱ、B7-1表达增加,细胞毒作用增强.在体外,质粒DNA协同IFN-γ对巨噬细胞产生更强的激活作用,而CH50多肽与质粒DNA没有协同作用;腹腔注射质粒DNA后,取出巨噬细胞再与IFN-γ共培养时,巨噬细胞的激活程度没有改变,而再与CH50作用时,巨噬细胞的激活明显增强.结论:质粒DNA在体内外能够激活巨噬细胞,但在体内、外的作用显然具有不同的机制,体外可以直接刺激巨噬细胞,且与IFN-γ有协同作用;体内则是间接激活巨噬细胞,这些巨噬细胞随后可被CH50多肽进一步激活.真核表达质粒用于肿瘤的基因治疗时,除了其表达产物的功能之外,质粒自身的免疫激活作用将进一步增强肿瘤治疗作用.