抗土拨鼠肝炎病毒核心蛋白单克隆抗体的制备、性质鉴定及初步应用

摘要

目的:研制出能特异与土拨鼠肝炎病毒核心蛋白(WHc)结合的单克隆抗体,使之能特异性地对土拨鼠肝炎病毒(WHV)进行检测,并可能应用于相关肝炎病毒的筛查.方法:以原核表达的土拨鼠肝炎病毒重组核心蛋白(WHc 1～149氨基酸)免疫BALB/c小鼠,常规杂交瘤技术进行细胞融合,有限稀释法克隆化,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组织化学(IHC)筛选、鉴定.结果:筛选出5株(4B1E、6C5D、6C5C、6D1D、6D1G)能稳定分泌抗土拨鼠肝炎病毒核心蛋白抗体的杂交瘤细胞株.此5株单抗适用于ELISA、IHC、Western blot等方面的研究,与HBcAg有交叉反应,并且在部分中国旱獭的肝脏组织进行IHC检测呈现阳性反应.结论:制备的5株单抗可用于土拨鼠肝炎病毒等嗜肝脱氧核糖核酸病毒的研究,可能在寻找新的相关肝炎病毒中起重要作用.