荞麦黄酮通过下调HMGB1抑制高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞损伤的研究

摘要

目的：探讨荞麦黄酮对高糖（HG）诱导的人视网膜微血管内皮细胞（HRMECs）损伤的影响及可能机制。方法：体外培养HRMECs，分为不同剂量（0、0.125、0.25、0.5、1、1.25、1.5、1.75、2 mg/ml）荞麦黄酮组，CCK-8法检测细胞抑制率。另将HRMECs分为正常对照（NC）组、HG组、HG+低荞麦黄酮组、HG+中荞麦黄酮组、HG+高荞麦黄酮组、HG+荞麦黄酮+pcDNA组和HG+荞麦黄酮+pcDNA-HMGB1组，CCK-8检测细胞抑制率，流式细胞术检测细胞凋亡，比色法检测MDA含量、LDH漏出量及SOD活性，ELISA检测IL-6、TNF-α和IL-10水平，蛋白质印迹法检测细胞中Bax、Bcl-2和HMGB1蛋白表达，RT-PCR法检测细胞中HMGB1 mRNA表达。结果：与0 mg/ml荞麦黄酮组比较，不同剂量（0.125、0.25、0.5、1、1.25、1.5、1.75、2 mg/ml）荞麦黄酮组HRMECs抑制率无显著变化（P＞0.05）。与NC组比较，HG组HRMECs抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量、LDH漏出量及IL-6、TNF-α水平均升高（P＜0.05）,Bcl-2蛋白表达、SOD活性和IL-10水平降低（P＜0.05）,HMGB1 mRNA和蛋白表达量均升高（P＜0.05）。与HG组比较，HG+低荞麦黄酮组、HG+中荞麦黄酮组、HG+高荞麦黄酮组HRMECs抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量、LDH漏出量及IL-6、TNF-α水平均降低（P＜0.05）,Bcl-2蛋白表达、SOD活性和IL-10水平升高（P＜0.05）,HMGB1mRNA和蛋白表达量均降低（P＜0.05）。与HG+荞麦黄酮+pcDNA组比较，HG+荞麦黄酮+pcDNA-HMGB1组HRMECs抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量、LDH漏出量及IL-6和TNF-α水平均升高（P＜0.05）,Bcl-2蛋白表达、SOD活性和IL-10水平降低（P＜0.05）,HMGB1 mRNA和蛋白表达量均升高（P＜0.05）。结论：荞麦黄酮可能通过下调HMGB1抑制HG诱导的HRMECs凋亡、氧化应激和炎症反应。