肝癌细胞中Wnt/β-连环素信号通路与caspase-3、X连锁凋亡抑制蛋白和葡萄糖调节蛋白78的表达

摘要

目的研究肝细胞癌中Wnt/β-连环素信号传导通路与caspase-3、X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）、葡萄糖调节蛋白78（Grp-78）、热休克蛋白（HSP）27的关系及其意义。方法用RNAi技术将针对β-连环素的siRNA转染入肝癌HepG2细胞中沉默β-连环素基因表达,于72、96 h提取蛋白质,用Western blot法检测β-连环素、caspase-3、XIAP、Grp-78、HSP27蛋白质的表达。用方差分析的方法进行统计学分析。结果对照组、转染72h组、转染96h组β-连环素蛋白质表达的灰度值分别为18.9、1.5和3.2;β-肌动蛋白表达的灰度值分别为41.1、45.6和47.8;caspase-3蛋白质表达的灰度值分别为49.8、5.2和45.1;p-caspase-3蛋白质表达的灰度值分别为16.0、67.7和16.3;XIAP蛋白质表达的灰度值分别为28.2、21.9和49.9;Grp-78蛋白质表达的灰度值分别为23.3、49.9和26.8;HSP27蛋白质表达的灰度值分别为29.6、34.8和35.6;β-肌动蛋白表达的灰度值分别为32.1、33.6和34.2。针对β-连环素的siRNA转染肝癌HepG2细胞72 h和96h均可抑制β连环素蛋白质的表达（F=160.72,P＜0.01）,而96h比72h的表达略有增加,差异有统计学意义。caspase-3的蛋白质表达于72 h被抑制,96 h升高恢复至原有水平（F=136.10,P＜0.01）;而p-caspase-3的蛋白质表达于72 h增加,96 h减少至原有水平（F=98.65,P＜0.01）。XIAP的蛋白质表达于72 h被抑制,96 h表达升高（F=37.29,P＜0.01）。Grp-78的蛋白质表达于72 h增加,96 h减少至原有水平（F=58.72,P＜0.01）。HSP27的蛋白质表达转染前后一致,差异无统计学意义。结论 HepG2细胞中,Wnt/β-连环素信号传导通路与caspase-3、XIAP、Grp-78蛋白质的表达有关,而与HSP27的蛋白质表达无关。Wnt/β-连环素信号传导通路正是通过调节这些因子参与HepG2细胞凋亡及增殖、分化等调节。