微小RNA-101a抑制IRE1α信号通路调控肝星状细胞诱导的肝纤维化

摘要

目的探讨微小RNA-101a（miRNA-101a）是否通过调控肌醇需要酶1α蛋白（IRE1α）信号通路介导肝星状细胞活化以及对肝纤维化的影响。方法建立CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型, 实时定量PCR检测肝组织中miRNA-101a的表达, Western印迹法检测α平滑肌肌动蛋白（αSMA）、I型胶原、IRE1α的蛋白表达。肝星状细胞（HSC）-T6处理分为HSC组、转化生长因子（TGF）β1活化组、TGFβ1+miRNA-NC组（转染miRNA-101a空白对照质粒）和TGFβ1+miRNA-M组（转染miRNA-101a模拟质粒）。给予对应干预后, 检测各组间miRNA-101a、αSMA、I型胶原和IRE1α的表达差异。结果与对照组小鼠相比, 实验组小鼠肝组织中纤维沉积明显[（0.17±0.06）%比（2.09±0.39）%], miRNA-101a相对表达水平下调[（1.00±0.05）比（0.43±0.05）], 差异有统计学意义（均P＆0.001）;而且实验组小鼠肝组织αSMA、I型胶原及IRE1α蛋白相对表达水平上调[（1.00±0.23）比（4.09±0.80）、（1.00±0.21）比（4.98±1.19）、（1.00±0.24）比（3.27±0.65）], 差异有统计学意义（均P＆0.001）。TGFβ1处理抑制HSC-T6细胞miRNA-101a表达, 诱导HSC-T6活化, 导致αSMA、I型胶原以及IRE1α蛋白表达上调;TGFβ1+miRNA-M组中miRNA-101a表达水平（1.89±0.20）明显高于TGFβ1+miRNA-NC组（0.59±0.19）, 差异有统计学意义（P＆0.001）。过表达miRNA-101a后, αSMA、I型胶原蛋白表达明显降低[（2.65±0.69）比（0.84±0.13）、（3.15±0.59）比（1.31±0.25）], 差异有统计学意义（均P＆0.05）;IRE1α蛋白表达亦下调[（2.63±0.47）比（1.03±0.15）], 差异有统计学意义（P＆0.001）。结论 miRNA-101a可能通过抑制IRE1α信号通路抑制肝星状细胞活化和肝纤维化形成。