鞘氨醇激酶1对肝癌耐药细胞生物学特性的影响

摘要

目的研究鞘氨醇激酶1（SPK1）对人肝癌耐药细胞株BEL-FU生物学特性的影响。方法将SPK1siRNA基因（Ad-H1-SPK1）及野生型SPK1基因(Ad-SPK1WT)导人人肝癌耐药细胞株BEL-FU。用试剂盒检测SPK酶活性,MTT法检测其对肝癌细胞凋亡的影响,Transwell法测定肝癌细胞侵袭力,Western-blot方法检测多药耐药相关蛋白1（MRP1）表达水平的变化。结果导入Ad-SPK1WT增强肝癌细胞SPK活性,转染SPK1siRNA（Ad-H1-SPK1）抑制肝癌细胞SPK活性;肝癌细胞导入SPK1后,抑制SPK特异性抑制剂N,N,-二甲基鞘氨醇（Dimethyl sphingosine,DMS）引起的肝癌细胞凋亡并促进肝癌细胞迁移和增加多药耐药蛋白（MRP1）的表达;阻断SPK1则显著促进细胞凋亡和明显抑制肝癌细胞迁移,且多药耐药蛋白（MRP1）表达量明显降低。结论 SPK1的活性与肝癌细胞的凋亡、侵袭力及多药耐药密切相关,阻断SPKl可为肝癌治疗提供新的靶点和策略。