缺血再灌注对小鼠肝细胞自噬与干扰素调节因子1表达的影响

摘要

目的探讨缺血再灌注对小鼠肝细胞自噬与干扰素调节因子1（IRF-1）表达的影响,阐述其潜在的分子机制。方法建立小鼠肝缺血再灌注损伤模型,检测再灌注2、6、12和24 h后各组与假手术组小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）的变化,同时在光镜下观察肝组织病理学改变,透射电镜下观察肝细胞内自噬体变化。分别利用免疫荧光及TUNEL法检测肝细胞LC3表达及细胞凋亡情况,RT-PCR检测肝组织IRF-1 mRNA表达,蛋白印迹检测IRF-1、Beclin1和LC3蛋白水平。结果与假手术组相比,缺血再灌注组在各时间点ALT和AST水平均有所增高,于再灌注12 h均达到高峰;病理学检查可见肝细胞肿胀、肝窦变窄、嗜中性粒细胞浸润和灶状坏死等变化。再灌注12 h时肝细胞内自噬体明显增多,同时凋亡细胞显著增加;肝组织中IRF-1、Beclin1和LC3的表达增加。结论小鼠肝缺血再灌注可激活自噬导致肝细胞损伤,其可能与促进IRF-1表达有关。