沉默胰腺癌上调因子对胰腺癌细胞株吉西他滨敏感性的影响

摘要

目的观察沉默胰腺癌上调因子（PAUF）对胰腺癌BxPC-3细胞吉西他滨敏感性的影响。方法 BxPC-3细胞中PAUF基因呈高表达,分别应用PAUF-shCtrl、PAUF-shPAUF转染BxPC-3细胞得到PAUF高低表达不同的对照组和实验组。应用实时聚合酶链式反应（RT-PCR）及蛋白印迹（Western blot）检测进行沉默后验证。MTT比色法检测两株细胞在不同浓度吉西他滨（0、3.1、6.25、12.5、25、50、100、200 nmol/L）作用下对细胞增殖抑制率的影响。流式细胞术检测不同浓度吉西他滨（0、75、100 nmol/L）作用下对细胞凋亡率的影响。结果 BxPC-3shCtrl细胞及亲本细胞PAUF mRNA的相对表达量为1.00±0.06、0.83±0.07,均显著高于BxPC-3shPAUF细胞的0.25±0.02（均P＆0.05）。BxPC-3shCtrl细胞及亲本细胞PAUF蛋白相对表达量为0.89±0.07、0.95±0.04,显著高于BxPC-3shPAUF细胞的0.31±0.03（均P＆0.05）。吉西他滨对BxPC-3shCtrl细胞的半数抑制浓度IC50为（22.88±2.43） nmol/L,显著高于BxPC-3shPAUF细胞的（1.06±0.02） nmol/L（P＆0.05）;BxPC-3shPAUF细胞的凋亡随着吉西他滨浓度的增加速度明显大于BxPC-3shCtrl细胞。结论 PAUF沉默后明显增加胰腺癌BxPC-3细胞对吉西他滨的敏感性。