膜结合型白细胞介素6受体β亚基突变体的构建及其对白细胞介素6信号的影响

摘要

目的 探讨只含白细胞介素６（ＩＬ－６）受体β亚基（ｇｐ１３０）胞外第二、三个ＦＮⅢ（ＣＢＤ）区的膜结合型ｇｐ１３０突变体（ｍｇｐ１３０）能否传导ＩＬ－６信号。方法 首先用重叠延伸ＰＣＲ方法扩增出ｍｇｐ１３０ｃＤＮＡ，将其克隆到真核表达载体ｐＲｃ／ＲＳＶ中；用脂质体转染法将此表达载体导入骨髓瘤细胞系ＳＫＯ－００７和Ｊｕｒｋａｔ细胞中，通过点杂交证明其得到有效表达；用阻滞电泳法比较野生型ｇｐ１３０和ｍｇｐ１３０分子传导ＩＬ－６信号的情况。结果 在ＳＫＯ－００７细胞中ＩＬ－６能激活ＡＰＲＦ，而将野生型和突变的ｇｐ１３０ｃＤＮＡ的表达载体分别导入细胞后，ＡＰＲＦ活性均得到增强，但野生型ｇｐ１３０增强的程度较突变体为高；在Ｊｕｒ－ｋａｔ细胞中ＩＬ－６不能激活核因子，导入野生型和突变的ｇｐ１３０ｃＤＮＡ的表达载体后，ＩＬ－