miR-27b靶向BNIP3对缺氧复氧心肌细胞Wnt/β-catenin通路及自噬的影响

摘要

目的 探讨微小RNA-27b(miR-27b)靶向B淋巴细胞瘤(Bcl)-2/腺病毒E1B 19-kD相互作用蛋白(BNIP)3对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞Wnt/β-catenin通路及自噬的影响.方法 体外培养大鼠H9c2心肌细胞,设置正常对照组(H9c2细胞正常培养)、H/R组(H9c2细胞经H/R处理)、H/R+NC组(H9c2细胞转染无序siRNA后经H/R处理)和H/R+miR-27b siRNA组(H9c2细胞转染miR-27b siRNA后经H/R处理).实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组H9c2细胞中miR-27b、BNIP3 mRNA表达情况;CCK-8法检测各组H9c2细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组H9c2细胞凋亡情况;Western印迹法检测各组H9c2细胞中BNIP3、轴抑制因子(Axin)1、β-连环蛋白(catenin)、微管相关蛋白1轻链(LC)3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达情况.结果 与正常对照组相比,H/R组H9c2细胞中miR-27b、BNIP3 mRNA表达水平、细胞凋亡率、BNIP3、Axin1、LC3Ⅱ蛋白表达水平均显著升高(P0.05);与H/R组、H/R+NC组相比,H/R+miR-27b siRNA组H9c2细胞中miR-27b、BNIP3 mRNA表达水平、细胞凋亡率、BNIP3、Axin1、LC3Ⅱ蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),细胞OD值、β-catenin、LC3Ⅰ蛋白表达水平均显著升高(P<0.05).结论 沉默miR-27b表达后可抑制BNIP3水平,激活Wnt/β-catenin信号转导通路,并抑制自噬过程.