脑缺血再灌注后内质网应激对听皮层的损伤作用及机制

摘要

目的 探讨内质网应激对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后听力损伤的作用及机制.方法 选择健康白色雄性SD大鼠30只随机分为Sham组和缺血再灌注组,每组15只.采用线栓法制备大脑中动脉栓塞模型,Sham组只分离颈部血管,不插入线栓.脑缺血60 min,再灌注24 h.于手术前及术后24 h检测听性脑干反应(ABR),术后24 h行神经功能评分,2,3,5-三苯基四唑氮红(TTC)法检测脑梗死体积,苏木素-伊红(HE)染色法观察听皮层神经元病理变化,末端标记法观察神经细胞凋亡状况,计算凋亡指数.免疫组化和Western印迹法测定葡萄糖调节蛋白(GRP)78、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-12蛋白表达.结果 与Sham组比较,缺血再灌注组神经功能评分明显升高,脑梗死体积明显增加;ABR听阈明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).HE染色Sham组神经元边界清楚,形态正常,结构完整,缺血再灌注组正常组织结构消失,细胞核固缩、深染,细胞周围空泡变,凋亡指数显著增加,GRP78、Caspase-12蛋白表达明显上升,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 内质网应激及其介导的凋亡与局灶性脑缺血再灌注后听功能损伤有关,GRP78、Caspase-12蛋白酶可能参与了内质网应激介导的听皮层神经元细胞凋亡过程.