淀粉样前体蛋白-C端片段对胚鼠原代皮层神经元cofilin磷酸化的影响

摘要

目的 探讨淀粉样前体蛋白-C端游离片段(APP-CTFs)对ADF/cofilin的影响及作用机制.方法 APP-CT99-pEGFP转染胎鼠原代皮层细胞,采用细胞免疫组化方法和蛋白印迹方法观察磷酸化cofilin和LIMK1的分布形态和表达水平.处理S3肽,LIMK1的特异性竞争性抑制剂后再观察磷酸化cofilin表达.结果 细胞免疫组化实验结果,转染APP-CT99-pEGFP的细胞中,磷酸化cofilin和LIMK1在细胞质和细胞核中均有分布,与空载体转染组比较分布较高.S3肽处理后,磷酸化cofilin的表达水平减少.蛋白印迹实验结果,转染APP-CT99-pEGFP的细胞中,磷酸化cofilin和LIMK1蛋白水平增高,与空载体转染组比较具有显著性差异(P＜0.05).S3肽处理后,磷酸化cofilin蛋白水平降低.结论 APP-CTFs通过LIMK1激酶调控cofilin磷酸化.