内皮祖细胞培养鉴定及其体外修复球囊损伤血管的实验研究

摘要

目的观察体外培养人脐带静脉血(脐血)内皮祖细胞(EPCs)对球囊损伤血管的修复作用.方法采用贴壁选择法培养人脐血内皮祖细胞,分别采用流式细胞术、DiI-ac-LDL吞噬试验及Ⅷ因子相关抗原免疫组化对培养细胞进行鉴定.球囊损伤法制备去内膜兔腹主动脉段,与EPCs共孵育使再内皮化.结果体外成功培养出人脐血内皮祖细胞,流式细胞术分析显示培养6 d后,白细胞分化抗原34(CD34)、血管内皮钙黏素(VE-Cadherin)、血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)及白细胞分化抗原133(AC133)阳性细胞比例分别为(65±12)%、(45±10)%、(31±10)%与(20±1)%,CD34-VE-Cadherin、VEGFR-2-VE-Cadherin、CD34-AC133及VEGFR-2-AC133双阳性细胞比例分别为(42±10)%、(28±15)%、(19±1)%与(15±7)%,DiI-ac-LDL吞噬试验及Ⅷ因子相关抗原免疫组化阳性.人脐血EPCs与去内膜兔腹主动脉共培育使之再内皮化,形成新内膜.结论利用脐血可成功培养出内皮祖细胞,体外培养内皮祖细胞可修复内皮损伤血管.