硫酸氨基葡萄糖抑制白介素1β诱导的人骨关节炎软骨细胞合成一氧化氮研究

摘要

目的研究硫酸氨基葡萄糖（GS）对白介素1β（IL-1β）诱导体外培养的人骨关节炎软骨细胞（HOC）合成一氧化氮（NO）的影响及其作用机制。方法取10例骨关节炎患者行全膝关节置换术的软骨标本获取软骨细胞进行培养。在HOC培养液中加入IL-1β（5μg/L）和不同浓度的GS（0.2 mmol/L,2.0 mmol/L,20.0 mmol/L）作用24 h,酶联免疫吸附（ELISA）测定检测细胞上清中的NO的含量,反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法和蛋白印迹法分别检测HOC中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA和蛋白的表达。结果 IL-1β刺激后HOC合成NO增加,iNOS mRNA和蛋白表达上调（t=-14.81,-45.38,均P＜0.01）。2.0 mmol/L和20.0 mmol/LGS浓度依赖式抑制IL-1β诱导HOC合成NO（F=12.43,P＜0.05）,抑制IL-1β诱导HOC中iNOS mRNA（F=142.28,P＜0.05）和蛋白的上调（F=78.08,P＜0.01）。单独使用20.0 mmol/L的GS对HOC合成NO无影响（t=-0.17,P＞0.05）。结论 GS通过下调HOC细胞内iNOS mRNA和蛋白的表达从而抑制IL1β诱导的NO合成。