高脂饮食对大鼠骨髓内皮祖细胞水平的影响及作用机制

摘要

目的探讨高脂饮食对大鼠骨髓源内皮祖细胞（EPCs）数量、氧化应激水平的影响及EPCs谷胱甘肽过氧化物酶-1（GPx-1）的表达,分析高脂饮食是否通过诱导氧化应激影响EPCs的数量及功能。方法清洁级健康雄性Wistar大鼠23只,随机分为正常对照组13只,高脂饮食组（高脂组）10只。对照组给予基础饲料,总热量为348 kcal/100 g;高脂组喂以高脂饲料,总热量为502kcal/100 g。16周后测定Lee’s指数、体质量,判断造模是否成功。造模成功后空腹颈动脉插管抽血,分离血清,测定胰岛素、血脂、氧化应激等指标。留取肾周、附睾周围脂肪,称质量。分离并培养EPCs,10 d后多波长激光共聚焦显微镜鉴定EPCs,并测定EPCs GPx-1的mRNA表达及蛋白表达。结果 16周后,高脂组与对照组比较,体质量分别为（465.1±27.7）g比（404.4±17.0）g,Lee’s指数312.1±9.8比297.7±8.8,腹腔内脂肪含量（20.1±1.9）g比（15.3±1.1）g,均增加（均P＜0.001）;空腹血糖（5.85±0.77）mmol/L比（4.29±0.74）mmol/L,胆固醇（1.35±0.21）mmol/L比（0.95±0.14）mmol/L,三酰甘油（1.02±0.21）mmol/L比（0.65±0.19）mmol/L,均升高（均P＜0.01）;空腹胰岛素（3.46±0.77）mmol/L比（2.04±0.51）mmol/L与胰岛素抵抗指数0.90±0.24比0.40±0.19,升高（P＜0.001）;超氧化物歧化酶（SOD）（72.8±5.4）mU/L比（80.4±7.9）mU/L,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）（759.1±60.7）mU/L比（826.3±65.8）mU/L,总抗氧化能力（TAOC）（5.18±0.35）InU/L比（6.01±0.93）mU/L,均降低（均P＜0.05）;丙二醛水平升高[（6.09±0.96）μmol/L比（5.14±0.89）μmol/L3（P＜0.05）;EPCs数量减少（62.55±4.85比71.19±5.95,P＜0.001）,GPx-1 mRNA表达（0.50±0.13比1.29±0.42）及GPx-1蛋白表达（0.50±0.13比1.29±0.42）均下降（P＜0.05和P＜0.01）。多元直线回归分析显示,丙二醛是EPCs的影响因素;Lee’s指数是GSH-Px的影响因素;总胆固醇是TAO-C及SOD的影响因素;空腹胰岛素是丙二醛的影响因素。结论高脂喂养可导致大鼠肥胖,内脏脂肪增加,胰岛素抵抗和EPCs数量减少,EPCs GPx-1mRNA表达及蛋白表达均下降,氧化应激是肥胖大鼠EPCs数量减少影响因素之一。