多巴胺与α-突触核蛋白在神经母细胞瘤细胞中的相互作用

摘要

目的研究多巴胺（DA）与α-突触核蛋白（α-synuclein）在神经母细胞瘤细胞中的相互作用机制,探讨二者在帕金森病（PD）发病中的作用。方法 3-（4,5二甲基噻唑-2）-2,5二苯基四氨唑溴盐（MTT）法确定外源添加DA的浓度,检测外源多巴胺对SH-SY5Y细胞α-synuclein、caspase-3活性片段表达及丙二醛含量的影响;野生型α-synuclein重组质粒转染SH-SY5Y细胞,观察细胞内多巴胺浓度、丙二醛含量、caspase-3活性片段表达水平的变化及多巴胺转运体抑制剂GBR12935对上述变化的影响。结果（1）外源添加300μmol/L多巴胺作用24 h后SH-SY5Y细胞内多巴胺浓度较空白对照组升高了接近16倍（t=7.32,P＜0.01）,α-synuclein、caspase-3活性片段表达水平及丙二醛含量均升高（t=4.92,P＜0.01;t=17.14,P＜0.01;t=6.55,P＜0.01）;（2）α-synuclein重组质粒转染SH-SY5Y后细胞内多巴胺浓度（F=32.97,P＜0.01）、丙二醛含量（F=107.80,P＜0.01）、caspase-3活性片段表达水平（F=55.54,P＜0.01）均较空载体转染组升高,但这种上升均被GBR12935部分遏制。结论多巴胺促进SH-SY5Y细胞α-synuclein表达,而过表达α-synuclein又导致SH-SY5Y细胞内多巴胺浓度升高,二者形成产生细胞毒性的恶性循环。