高糖对原代成骨细胞增殖分化的影响

摘要

目的观察不同浓度葡萄糖对原代成骨细胞增殖和细胞分化的影响。方法取新生小鼠颅骨进行原代培养。经碱性磷酸酶染色和VonKossa染色检测鉴定为成骨细胞。用不同浓度葡萄糖（5.5、15.5、25.5 mmol/L）培养基培养细胞,观察不同葡萄糖浓度下成骨细胞的细胞增殖、碱性磷酸酶（ALP）染色,Real-timePCR检测转录因子Runx2、成骨标志物ALP、骨钙素基因的表达。结果随着葡萄糖浓度的升高成骨细胞的增殖能力逐渐减弱。培养7 d,与5.5 mmol/L正常糖组相比,15.5 mmol/L组和25.5 mmol/L组ALP染色颜色逐渐变浅。PCR结果显示Runx2mRNA表达分别下降了（36.7±6.2）%和（38.3±2.2）%,骨钙素mRNA表达分别下降了（26.7±7.2）%和（40.4±4.3）%;ALP mRNA在15.5 mmol/L组下降了（33.3±10.2）%,在25.5 mmol/L组增高了（50.8±10.4）%（均P＜0.05）。结论高糖能抑制成骨细胞的增殖,抑制其向成熟成骨细胞分化,这可能是糖尿病性骨质疏松的机制之一。