miR-193a-3p通过HR通路促进食管鳞癌细胞放射抵抗的初步研究

摘要

目的 探讨miR-193a-3p对食管鳞癌细胞放射敏感性的影响及其相关作用机制.方法 6MV-X射线照射4株食管鳞癌细胞,采用MTT法检测细胞相对存活比例;茎环引物实时定量PCR法检测miR-193a-3p在细胞中的表达水平;合成miR-193a-3p-mimic(3PM)和miR-193a-3p-antagomiR(3PA)并分别转染至细胞,MTT法和流式细胞分析术检测miR-193a-3p对放射耐受性的影响,细胞增殖实验检测miR-193a-3p对细胞增殖能力的影响;蛋白质印迹法检测r-H2AX及RAD51蛋白表达水平.结果 筛选出放射敏感细胞株(KYSE150)及耐受细胞株(KYSE410)(4.3 Gy:13.9 Gy);miR-193a-3p的表达水平在KYSE410中高于KYSE150,差异显著(1:192);与对照组相比,过表达miR-193a-3p组食管鳞癌细胞放射敏感性降低(t=21.27,P<0.05),细胞凋亡比例下降11.10％,细胞增殖能力显著增加(P<0.05);抑制表达miR-193a-3p组食管鳞癌细胞放射敏感性增加(t=9.614,P<0.05),细胞凋亡比例增加3.63％,细胞增殖能力显著下降(P<0.05);蛋白质印迹法检测结果显示,在辐照后18 h,与对照组相比,上调miR-193a-3p表达,r-H2AX蛋白表达量减少(1.00:0.85),抑制miR-193a-3p表达,r-H2AX蛋白表达量增加(1.00:1.28),而RAD51蛋白表达量与之相反(1.00:1.55;1.00:0.63).结论 miR-193a-3p促进食管鳞癌细胞放射耐受性,其机制可能与促进DNA损伤后修复有关.