不同启动子驱动HDV核酶的逆转录病毒载体构建

摘要

目的 分别构建CMV、H1、tRNA、U2、U3和U6启动子驱动反式丁型肝炎病毒核酶(HDV核酶)的逆转录病毒表达载体.在这些载体中,HDV核酶设计为靶向HBV基因序列PreS2和C区.方法 用PCR技术分别扩增CMV、U2和U3启动子,并连入pMD18-T载体.合成靶向PreS2和C区HDV核酶并利用Sal Ⅰ和Hind Ⅲ的酶切位点分别连入逆转录病毒表达载体pLEGFP (pLEGFP-Rz).然后利用BamH Ⅰ和Sal Ⅰ的酶切位点分别把CMV、H1、tRNA、U2、U3和U6启动子连入重组载体pLEGFP-Rz.所有的重组载体经PCR和酶切的方法验证.结果 成功地构建了分别含有6种启动子驱动HDV核酶的逆转录病毒载体.结论 这些重组载体的构建为筛选高效表达核酶的启动子奠定基础.同时这些重组载体也可用于进一步研究HDV核酶抑制HBV复制的效率.