体外不同诱导条件下对大鼠胚胎肝干细胞分化影响的实验研究

摘要

目的 探讨和比较不同体外条件对大鼠胚胎肝干细胞分化成熟的影响. 方法 将取自孕14 d胎龄F344大鼠胚胎肝组织的肝干细胞分别接种至含10、20、40 ng/mL HGF,0.5%、1%、2%二甲基亚砜(DMSO),10 ng/mL HGF+0.5% DMSO、20 ng/mL HGF+1% DMSO、40 ng/mL HGF+2% DMSO以及空白的培养基中进行体外培养15 d;诱导15 d后,ELISA检测和比较不同组细胞内甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)的浓度,实时定量PCR比较不同组细胞ALB、葡萄糖6-磷酸酶(G-6p)、角蛋白8、18(CK-8、CK-18)的mRNA的表达水平. 结果 与空白对照组相比,诱导15 d后各实验组肝干细胞ELISA检测AFP明显下降(P<0.01),ALB明显升高(P<0.01);实时定量PCR结果 表明各实验组ALB、G-6P、CK-8、CK-18 mRNA水平较对照组均明显升高,其中大鼠胎肝干细胞体外最佳诱导条件为20 ng/mL HGF+1% DMSO(P<0.05).结论 HGF和DMSO均可在体外诱导大鼠肝干细胞分化,不同浓度HGF和DMSO 影响其分化成熟程度;HGF、DMSO对大鼠胚胎肝干细胞的分化具有协同效应.