长链非编码RNA-重编程调控因子调节脂肪酸合成促进胰腺癌细胞侵袭迁移的研究

摘要

目的探究长链非编码RNA-重编程调控因子（Linc-ROR）对胰腺癌细胞侵袭、迁移及脂肪酸合成的调节及其机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测Linc-ROR在4种细胞中的表达水平。在PANC-1细胞系中单独转染pCDH-Linc-ROR过表达质粒或联合转染该质粒和脂肪酸合酶（FASN）的小干扰RNA（siRNA）后, 尼罗红染色法观察脂肪酸合成;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移、侵袭;蛋白免疫印迹法检测脂肪酸合成相关蛋白的变化。结果 Linc-ROR表达水平在3种胰腺癌细胞系中明显高于正常胰腺导管上皮细胞（1.56±0.10、45.53±3.74、147.80±7.21比1.00, F=869.1, P＆0.01）。与对照组比较, 转染pCDH-Linc-ROR质粒后侵袭能力增强（272.70±25.70比101.00±16.52, P＆0.01）, Transwell迁移实验显示该组迁移能力增强（691.30±34.67比274.70±12.06, P＆0.01）, 划痕实验同样证明该结果（35.01±2.22比22.47±2.09, P＆0.01）, 染色后荧光显示脂肪酸合成增强, 脂肪酸合成相关蛋白增加（3.11±0.17、1.77±0.08、1.22±0.08、1.15±0.06、1.2±0.09、1.88±0.10、1.13±0.08比1.00, P＆0.05）。进行联合转染Linc-ROR过表达质粒及siRNA后, pCDH-Linc-ROR+si-FASN相较于pCDH-Linc-ROR+si-NC组划痕实验证明显示迁移能力下降（34.38±1.12比52.88±2.19, P＆0.01）, Transwell迁移实验提示相同的结果（382.00±19.08比771.70±13.58, P＆0.01）, 并且该组侵袭能力减弱（309.00±22.34比601.70±20.03, P＆0.01）, FASN蛋白水平明显下降（1.004±0.05比3.122±0.17, P＆0.01）, 且染色后荧光示细胞脂肪酸的合成降低。结论 Linc-ROR可能通过影响FASN来蛋白的调控脂肪酸合成进而促进PANC-1细胞的侵袭和迁移。