半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3抑制剂早期干预在脓毒症急性肾损伤中的作用

摘要

目的观察半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）抑制剂Ac-DEVD-CHO在脓毒症诱导的急性肾损伤（AKI）中的作用。方法健康清洁级雄性C57BL/6小鼠72只,随机分为3组（每组24只）:假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孔组（CLP组）和Caspase-3抑制剂组（CI组）。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症AKI小鼠模型。CI组术后30min立即给予4μg/g Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO皮下注射。于术后6、12、24 h各组小鼠取血及肾组织,测定血清肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）浓度,观察肾组织光镜下病理学变化并检测肾组织细胞凋亡率及凋亡相关因子Caspase-3、B淋巴细胞/白血病-2（bcl-2）、bax蛋白在肾组织中的表达。结果与Sham组比较,CLP组血清Cr术后6 h、BUN术后6 h和12 h显著升高（P＜0.05）;肾组织损伤评分、肾组织凋亡率各时间点均显著增高（P＜0.05）;术后24 h肾组织Caspase-3、bcl-2、bax表达上调（P＜0.05）。与CLP组比较,CI组术后6 h血清Cr、BUN浓度显著下降[血清Cr:（83.82±10.15）μmol/L比（123.05±33.48）μmol/L;BUN:（10.15±4.34）mmol/L比（14.02±3.51）mmol/L,P＜0.05];肾组织损伤评分、肾组织细胞凋亡率各时间点均显著降低[肾组织损伤评分6 h:（0.88±0.64）分比（2.17±0.75）分,12 h:（0.63±0.74）分比（1.83±0.98）分,24 h:（1.83±0.98）分比（1.33±0.52）分;肾组织细胞凋亡率6 h:（13.28±0.91）%比（18.27±1.40）%,12 h:（9.71±0.91）%比（15.86±3.51）%,24 h:（8.45±0.55）%比（12.48±2.14）%,P＜0.05];肾组织Caspase-3及促凋亡因子bax表达下调,而抗凋亡因子bcl-2表达上调（P＜0.05）。结论 Caspase-3抑制剂可抑制肾组织细胞凋亡,从而起到肾保护性作用。