热休克蛋白70调控内质网钙通道相关蛋白对心肌细胞凋亡的影响

摘要

目的观察热休克蛋白70（HSP70）在心肌内质网应激（ERS）诱导的细胞凋亡中的作用,探讨HSP70调控内质网应激诱导细胞凋亡、分泌和钙信号转导的分子机制。方法应用转基因技术和反义寡核苷酸导入技术诱导和抑制HSP70基因在SD乳鼠心肌细胞的表达,建立细胞培养和缺氧模型,测定细胞凋亡率,提取内质网测定HSP70对ERS导致的内质网内外游离钙、活性氧（ROS）含量的变化及内质网钙三磷酸腺苷酶（SERCA）和钙敏感受体（CaSR）的表达。结果空白组早期细胞凋亡率为（9.28±0.83）%、晚期细胞凋亡率为（28.60±1.83）%、ROS生成率为80.0%,HSP70基因转染组早期细胞凋亡率为（4.30±0.72）%、晚期细胞凋亡率为（11.6±1.66）%、ROS生成率为38.5%,HSP70反义寡核苷酸处理组早期细胞凋亡率为（29.3±2.54）%、晚期细胞凋亡率为（34.4±2.43）%、ROS生成率为77.0%,表明HSP70显著抑制细胞凋亡和ROS的产生;HSP70基因转染组CaSR蛋白表达水平明显小于HSP70反义寡核苷酸处理组,而SERCA差异无统计学意义,这表明HSP70显著抑制CaSR的表达,但并不影响SERCA的表达。结论 HSP70通过抑制Ca2+电流从而抑制CaSR的表达,并且在ROS诱导的Ca2+电流中起重要作用。