视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因RIZ1/RIZ2表达失衡调控食管鳞癌细胞凋亡的研究

摘要

目的探讨在食管鳞癌中视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因（RIZ1/RIZ2）表达失衡对食管鳞癌细胞凋亡的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）的方法检测食管鳞癌组织及正常食管上皮组织中RIZ1及RIZ1+RIZ2 mRNA表达水平,选取前期实验中RIZ1基因表达缺失的食管鳞癌细胞株EC109,采用脂质体转染的方法实验组转染pcDNA3.1（+）/RIZ1,对照组转染空真核表达载体pcDNA3.1（+）,Real-time PCR、Western blot分别检测RIZ1 mRNA及蛋白表达水平,验证转染效率,转染成功后Real-time PCR法检测RIZ1+RIZ2 mRNA表达水平的变化,同时采用流式细胞仪检测食管鳞癌细胞的凋亡。结果食管鳞癌组织中RIZ1 mRNA表达水平低于正常食管上皮组织,相对表达量分别为1.00和28.10±2.30,差异有统计学意义（t=-57.758,P=0.000）,而两者间RIZ1+RIE2 mRNA表达水平分别为1.00和1.08±0.31,差异无统计学意义（t=-1.180,P=0.249）,食管鳞癌细胞株EC109转染RIZ1成功后,与对照组比较,RIZ1基因mRNA表达水平上调,相对表达量分别为10.83±1.94和1.00,差异有统计学意义（t=-11.308,P=0.000）,RIZ1+RIZ2 mRNA的表达水平未见变化,相对表达量分别为0.98±0.08和1.00,差异无统计学意义（t=0.581,P=0.592）,转染RIZ1后食管鳞癌细胞株EC109凋亡率升高,细胞凋亡率分别为（54.97±2.33）%和（38.29±8.44）%,差异有统计学意义（t=-4.560,P=0.010）。结论食管鳞癌中存在RIZ1/RIZ2的表达失衡,这种表达失衡有可能引发细胞凋亡,参与食管鳞癌的发生、发展。