同源异型核基因1诱导乳腺癌细胞发生上皮-间充质转化对三苯氧胺耐药的研究

摘要

目的观察同源异型核基因1（Prrx1）过表达诱导乳腺癌细胞发生上皮-间充质转化（EMT）对三苯氧胺（TAM）耐药的影响。方法脂质体转染法转染Prrx1低表达细胞株MCF-7细胞,实验组细胞为转染Prrx1基因的MCF-7细胞,空白对照组为转染空白载体的MCF-7细胞,阴性对照组为MCF-7细胞,倒置荧光显微镜观察转染效率,Western blot验证转染成功,反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测Prrx1对E-钙黏蛋白（E-cadherin,E-cad）及波形蛋白（Vimentin）mRNA表达水平的影响后,采用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测3组细胞对三苯氧胺的耐药性。结果转染后荧光效率达80%以上,实验组Prrx1蛋白表达水平明显高于对照组,且差异有统计学意义（P=0.000）,两对照组之间差异无统计学意义（P=0.326）。Prrx1 mRNA在阴性对照组、空白对照组、实验组中CT值分别为13.502±0.360、13.770±0.642、5.203±0.231,实验组Prrx1 mRNA表达水平为阴性对照组的320倍;E-cad mRNA在阴性对照组、空白对照组、实验组CT值分别为18.471±0.076、18.611±0.108、19.394±0.400,实验组E-cad mRNA表达水平为阴性对照组的0.560倍;Vimentin mRNA在阴性对照组、空白对照组、实验组CT值分别为19.422±0.082、19.484±0.021、17.817±0.061,实验组Vimentin mRNA表达水平为阴性对照组的3.030倍。三苯氧胺作用24 h后,实验组半数抑制浓度(IC50)明显高于阴性对照组（P=0.000）和空白对照组（P=0.000）,差异有统计学意义,而阴性对照组和空白对照组之间差异无统计学意义（P=0.150）。结论 Prrx1过表达可诱导MCF-7细胞发生EMT现象促进对三苯氧胺产生耐药。