纳米金结合重组人血管内皮抑素对人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡及迁移的影响

摘要

目的观察纳米金结合重组人血管内皮抑素对原代人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）增殖、凋亡及迁移的影响,并探讨其机制。方法将原代HUVECs培养传至第4代,分为对照组、重组人血管内皮抑素组（ES）、纳米金组（AU）和纳米金结合重组人血管内皮抑素组（AU-ES）。采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法分别检测在24、48、72 h和25、50、100μg/ml下各组细胞增殖抑制率,可得出最佳时间及浓度组合条件;在该条件下采用流式细胞仪、Transwell实验观察各组HUVECs的凋亡率、迁移能力的变化;采用Western blot检测各组与细胞增殖、凋亡及迁移功能相关蛋白质表达水平变化。结果 （1）CCK-8结果表明在不同浓度及时间下,AU-ES组（24h,100μg/ml）增殖抑制率为（35.166±3.076）%,差异有统计学意义（t=4.251,P=0.013）;（24 h,100μg/ml）为最佳处理条件;（2）流式细胞仪结果表明在24h,100μg/ml下,AU-ES组对HUVECs的凋亡率为（27.197±0.390）%,与对照组[（10.357±3.012）%]比较,差异有统计学意义（t=9.603,P=0.001）;（3）Transwell实验24 h后小室底膜迁移面积比为（42.943±3.129）%,与对照组（58.98±1.543）%比较,差异有统计学意义（t=7.963,P=0.001）;（4）与细胞增殖、凋亡及迁移有关蛋白如:B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、c-Myc、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、血管内皮因子生长受体-2（VEGFR-2）、波形蛋白（Vimentin）,与对照组比较AU-ES组的蛋白表达水平是明显降低。结论在一定条件下AU-ES能对原代HUVECs具有抑制增殖及迁移、促进凋亡的作用,并且降低有关蛋白的表达。