反相高效液相色谱法测定人视网膜中辅酶Q10的含量

摘要

目的建立一种通过高效液相色谱法(HPLC)检测人视网膜中辅酶Q10(CoQ10)含量的方法。方法10例新鲜健康人尸眼(年龄20～28岁)视网膜经分离、匀浆、冻干后,以甲醇脱蛋白,再经己烷萃取,萃取液进样进行HPLC分析。采用Onyx Monolithic C18柱,流动相采用含0.42%醋酸钠的甲醇-己烷-乙酸-异丙醇溶液(体积比为55∶9∶1∶1),紫外线检测波长为275nm。结果采用HPLC从人视网膜中成功地提取出CoQ10,此方法CoQ10的检测限为0.14mg/L。在0.20～395.00mg/L质量浓度范围内,CoQ10峰面积与相应质量浓度呈良好的线性关系。重复性检测获得CoQ10质量浓度在0.86、2.59、3.45mg/L时的相对标准差分别为2.7%、0.1%和3.3%。日内和日间相对标准差分别为1.6%和3.7%。回收率为101%～113%。用此方法检测10例人尸眼视网膜CoQ10平均含量为(0.51±0.20)μg/眼。结论人视网膜中CoQ10的含量可以通过反相HPLC法进行定量检测。