PD-L1在宫颈鳞状细胞癌中的表达及免疫调控作用

摘要

目的 揭示宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)组织中E6、E7、PD-L1的表达及相关性,初步探讨E6、E7对PD-L1的免疫调控作用.方法 采用Western blot(WB)检测人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)阴性正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)组织及HPV16、52、58阳性CSCC组织中E6、E7及PD-L1的表达情况,并选取HPV16阳性CSCC组织及HPV阴性CSCC组织进行原代细胞分离、鉴定及培养;构建E6、E7 siRNA,经脂质体转染HPV16阳性CSCC细胞,通过WB检测其细胞中PD-L1表达情况;同时构建E6、E7基因表达质粒,在HPV阴性CSCC细胞中过表达E6、E7,WB检测PD-L1的表达.结果 HPV阴性正常宫颈组中未检测到E6、E7及PD-L1的表达,而HPV16、52、58阳性CSCC组中,三者表达均明显高于CIN组(P＜0.01);成功分离培养出原代HPV16阳性CSCC细胞及HPV阴性CSCC细胞,分别命名为H16CC细胞株和HNCC细胞株;抑制H16CC细胞株中E6、E7表达后,PD-L1表达明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05),而过表达HNCC细胞株中E6、E7后,PD-L1表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CSCC中PD-L1的表达与E6、E7呈正相关,E6、E7可能通过介导PD-L1的免疫逃逸机制来调控CSCC的发生发展.