外泌体源性circ_0009362调控miR-29b-3p介导人骨髓间充干细胞成骨分化

摘要

目的:探讨血清外泌体源性circ_0009362对人骨髓间充干细胞（human bone marrow mesenchymalstem cells，hBMSCs）成骨分化的影响及潜在作用机制。方法:收集骨质疏松症（osteoporosis，OP）患者的血清并分离外泌体，使用qRT-PCR检测外泌体中circ_0009362的表达水平。诱导hBMSCs成骨并检测细胞中circ_0009362、miR-29b-3p的表达。双荧光素酶报告实验检测circ_0009362、miR-29b-3p的相互调控关系。碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测ALP活性，茜素红（ARS）染色法检测钙沉积。结果:与健康对照组相比，OP患者的血清外泌体中circ_0009362表达升高，诱导hBMSCs成骨后circ_0009362的表达降低（均 P<0.05）。外泌体能降低hBMSCs中ALP活性与钙沉积百分比，该作用通过分泌circ_0009362实现。敲减外泌体中circ_0009362表达能部分抵消外泌体的作用（均 P<0.05）。诱导hBMSCs成骨后miR-29b-3p的表达提高（ P<0.05）。circ_0009362与miR-29b-3p存在靶向关系，外泌体通过分泌circ_0009362抑制miR-29b-3p的表达。过表达miR-29b-3p促进hBMSCs中ALP活性与钙沉积百分比，该作用被外泌体部分抵消（均 P<0.05）。 结论:OP患者的血清外泌体通过分泌circ_0009362下调miR-29b-3p的表达来抑制hBMSCs成骨分化。